血小板作为一种多功能细胞,不仅可在止凝血中发挥作用,而且在血管生成、组织修复和炎症等过程中也扮演着重要角色。如,20世纪70年代,富血小板血浆(plateletrichplasma,PRP)的创伤修复研究即已进行。

年Hood等首先提出富血小板血浆(PRP)概念,并发现PRP含有丰富的血小板,其数目比全血中数目高3倍以上。血小板中含有大量的生长因子,如血小板衍生生长因子(PDGF),转化生长因子-β(TGF-β),类胰岛素生长因子(IGF),表皮生长因子(EGF),血管内皮生长因子(VEGF)等。在口腔科及骨科领域,富血小板血浆研究很热门。

富血小板血浆富血小板血浆是将动物或人的全血经过离心后得到的富含高浓度血小板的血浆,在其中加入凝血酶后可变为胶状物,因此也被称为富血小板凝胶或富血小板白细胞凝胶(PLG),通常为人体正常血小板浓度的3-5倍。PRP中含有大量的生长因子如血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子β(TGF-β)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)等。

PRP的临床治疗起始于上世纪90年代,由于PRP中富含血小板、血浆蛋白等多种成分,尤其是血小板中富含的多种生长因子、组织因子和抗菌肽等活性蛋白具有止血效果,同时能刺激损伤组织细胞的增殖、分化和迁移,促进损伤部位的胶原蛋白基质沉积和血管的再生,缩短创面修复过程的出血期、炎症期和增殖期,加速创面的表皮化生长,促进损伤组织的修复,从而广泛用于各类急慢性创面修复治疗

PRP生物学特征

PRP促进骨再生的主要机制是它能为骨缺损的局部微环境释放一些生长因子,其中发挥主要作用的生长因子是存在于α颗粒中的PDGF和TGF-β。α颗粒中的TGF-β大多以其前体形式存在,当机体局部受创时,其前体通过胞吐途径并被一些相关酶激活转变成为活性转化生长因子β。当在PRP中加入凝血酶及氯化钙等催化剂后,其血小板中的生长因子被激活并被释放出来,进而促进各种组织的修复与再生。研究发现,PRP未被激活时,其血小板中α颗粒释放的生长因子量较少,而被激活后其生长因子释放量则大大增加,并且激活后的PRP促增殖作用明显强于未激活组。并且随着凝血酶浓度的增加,PRP释放生长因子的量也随之增加。

富血小板血浆凝胶功能成分

血小板源性生长因子:一种促细胞分裂蛋白,第一个被发现存在于血小板中,是趋化作用最强的骨生长因子之一。

作用:可促进血管生成、活化巨噬细胞,刺激成纤维细胞、血管平滑肌细胞、神经胶质细胞等中胚层细胞的增殖和活性。

白细胞:参与机体免疫和防御功能,帮助机体清除局部病原体、增强抗感染能力;帮助机体清除局部坏死组织,加快组织修复。受血小板分泌生长因子趋化,本身可分泌生长因子直接参与组织修复。

其它成分:

1、纤维连接蛋白:影响细胞的黏附、迁移或肿瘤转移、胚胎发育、生长和分化等。

2、血小板反应蛋白:可以支持细胞附着,粘附和扩散。

3、骨粘连蛋白:作为一种广泛表达的细胞外蛋白,骨粘连蛋白不仅能作为细胞外基质的结构蛋白,同时也能作为多种物质的调节蛋白。骨粘连蛋白主要通过与Ca2+及胶原结合的方式,调节多种生命活动。其在骨的形成和改建中发挥着重要作用。

4、玻璃体连接蛋白:一种与免疫系统的补体、血凝系统的抗凝血酶Ⅲ、纤溶系统的纤维蛋白溶酶原激活物抑制剂Ⅰ的功能有关的多功能细胞粘附因子,是细胞外基质的组成成分之一。

这些物质对伤口感染、促进组织修复及增加新生血管内膜的形成发挥重要作用。

PRP凝胶离心后分离的上层液体称为PRP凝胶上清液。其亦富含多类多种生物活性蛋白,可促进伤口愈合及组织再生。

PRP、PRP凝胶和PRP凝胶上清液三者可在创伤修复不同阶段发挥重要作用。

PRP的制备

PRP取材方便、制备简单及可吸收等特点使其在各类组织缺损尤其是骨缺损修复方面拥有着广阔的应用前景。

现如今,PRP的制备方法尚未形成统一的标准,其制备主要有密度梯度离心法和血浆分离置换法2种方法。密度梯度离心法是根据血液中各组分沉降系数的不同,从全血中分离提取出PRP,现如今普遍采用二次离心法,然而不同的离心力及离心时间所制备的PRP中血小板浓度和活性各不相同。血浆分离置换法则利用医用血成份分离设备将全血分离制备成血小板血浆和浓缩血小板等成分,此法主要应用于血库血小板的采集及临床成分输血。

适应证与禁忌证

PRP的适应范围非常广泛,但临床应用研究的时间相对较短,国内外尚无明确、通用的适应证和禁忌症标准。

PRP总体治疗原则:根据临床治疗目的、结合患者实际情况综合判断。自体PRP与异体PRP治疗应有严格区别。

败血症和接受治疗的局部严重感染是PRP治疗的禁忌症。自体PRP治疗时,血小板功能障碍、重度血小板减少症等亦应纳入禁忌症。此外,血液病,如血小板功能障碍、严重贫血、血源性感染以及凝血酶过敏等,是PRP治疗的相对禁忌证。

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