临沂白癜风医院 http://m.39.net/pf/a_5837446.html 用针对表面膜糖蛋白的抗体标记血小板,然后通过流式细胞术分析,是一种快速而灵敏的血小板功能检测技术。适用于全血、PRP或洗涤过的血小板。全血需要的样本量很少,因此特别适合新生儿。 流式细胞术在血小板疾病中的适用场景包括 ?监测GpIIb/IIIa拮抗剂治疗效果?血小板表面糖蛋白遗传缺陷的诊断?贮存池病(storagepooldisease)的诊断?肝素诱导的血小板减少症的诊断?斯科特综合征的诊断等等 全血流式细胞术克服了PRP样本的许多固有问题: ?更能反映生理功能?由于样本操作步骤很少,所以血小板人为活化能够最小化?可以同时分析多个血小板受体?新的抗体可以很容易地纳入现有的方法?只需要少量血液?可用于有明显血小板减少症的患者 我们一般采用三种针对特定血小板膜糖蛋白的抗体[CD41、CD61和CD42b],CD41识别血小板膜糖蛋白GPIIb(即整合素αIIb链,它与GpIIIa「整合素β3链」非共价结合以形成GpIIb/IIIa复合物);CD61识别血小板膜糖蛋白GpIIIa(整合素β3链);CD42b与巨核细胞和血小板上的GPIb反应,CD42b还抑制瑞斯托菌素依赖的血管性血友病因子(vonWillebrandfactor,vWF)与血小板的结合和瑞斯托菌素诱导的血小板凝集。 1.正常血小板:在图1中,正常血小板是根据前向和侧向光散射选择的,并以绿色圈出。在图2和图3中,正常血小板呈CD41(GPIIb)和CD61(GPIIIa)、CD42b(GPIb)阳性: 2.血小板无力症(GlanzmannsThrombasthenia):在图5和6可见,该患者的血小板CD41、CD61均阴性,说明缺失GPIIb/IIIa复合物,这是血小板无力症的特征。不过,在图6中可见其CD42b是正常的。 3.巨大血小板综合征(BernardSoulierSyndrome):这里的设门跟前面略有不同,采用CD61圈出血小板。在下图1中,通过CD61/SSC圈血小板,然后图2和图3,可见其CD41和CD42b均表达正常,说明血小板存在正常的GPIIb-IIIa和GPIb受体。 在下图5、6、7则是巨大血小板综合征的患者,该患者的CD41和CD61正常,表明GPIIb-IIIa受体复合物表达正常,但在图6中,有两类血小板,一类(占总血小板的53%)CD61和CD42b均正常,这些是输注到患者体内的正常血小板,而另一类(占47%)则是CD42b(GPIb受体)缺失,是患者自身的血小板。 备注1.流式细胞术可用于只有少量血液(如新生儿)时。2.与成人血小板相比,静息新生儿血小板的GPIIb/IIIa受体表达明显降低。然而,新生儿血小板显示GPIa/IIa和GPIb受体表达正常。3.流式细胞术也可以通过分析AnnexinV与血小板膜磷脂的结合来筛查Scott综合征。4.血小板活化可以通过CD62b(即PSelectin,α颗粒膜的一种成分)或CD63(血小板致密颗粒和溶酶体膜的整合蛋白)检测。5.血小板微颗粒可通过流式检测,在止血方面越来越受到
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